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444 - Comparaison de l'expression du gène Wfs1, codant pour la wolframine, dans la rétine et divers organes de rats RCS et de rats congéniques controles entre P37 et 5 mois

Le syndrome de Wolfram est défini par un diabète insulino-dépendant, un diabète insipide, une atrophie du nerf optique et une surdité. il est causé par des mutations du gène WFS1 qui code pour la Wolframine, protéine du réticulum endoplasmique intervenant dans la maturation des protéines ainsi que dans l'interaction avec le récepteur de l'IP3 dans le cadre de la libération intracellulaire du calcium vers le canal VDAC mitochondrial. Nous avons étudié l'expression du gène Wfs1 chez les souches de rats congéniques RCS et contrôle dans le but de déterminer si la wolframine est impliquée dans la physiopathologie de la dégénérescence du rat RCS

Nous avons utilisé L'hybridation in situ sur coupes de tissus, la RT-PCR semi-quantitative , l'immunohistochimie et l'analyse par western blot pour évaluer l'expression des ARNm et des protéines Wolframine dans les tissus mutés RCS et contrôles : rétine, cervelet, rein et testicule.

Nous avons pu déterminer que tant les ARNm que les protéines Wolframine s'expriment dans toutes les couches rétiniennes normales en particulier dans l'épithélium pigmentaire de la rétine, les photorécepteurs les neurones de la couche nucléaire interne et les cellules ganglionnaires ainsi que dans la couche granulaire et les cellules de purkinje du cervelet, les tubules collecteurs du rein, les tubules séminifères des testicules. Entre 37 jours post-natal et 5 mois, tant l'expression des ARNm que des Proteines Wfs1 diminue de façon drastique dans la rétine des rats RCS par rapport aux rats contrôles. Les autres organes ne présentent aucune variation entre rats RCS et contrôles

La diminution des ARNm et des protéines Wolframine est particulièrement marquée dans les photorécepteurs et les cellules ganglionnaires des rats RCS entre 37 jours post-natal et 5 mois par rapport aux rats contrôles. La wolframine est impliquée dans le blocage du stress induit par le réticulum endoplasmique en présence de protéines mal conformées. L'abrogation de la phagocytose des articles externes des photorécepteurs par l'épithélium pigmentaire de la rétine des rats RCS aboutit à l'accumulation de débris cellulaires liées à l'apoptose cellulaire et à la dégradation progressive de toutes les couches rétiniennes des rats RCS.

Cette étude incite à approfondir les recherches concernant les ARNm et les protéines interagissant avec Wfs1 dans la dégénérescence du rat RCS dans le but d'essayer de diminuer le stress oxydatif et d'améliorer l'homéostasie énergétique des rétines dystrophiques